Click-Chemie ist ein Sammelbegriff f\u00fcr eine Klasse chemischer Reaktionen, die schnell, selektiv und unter milden Bedingungen ablaufen, mit hoher Ausbeute und wenigen unerw\u00fcnschten Nebenprodukten. Die bekannteste Variante in der Peptidforschung ist die Azid-Alkin-Cycloaddition: Eine Azidgruppe und eine Alkingruppe reagieren miteinander zu einem stabilen Triazolring. F\u00fcr Labore, die mit Forschungspeptiden arbeiten, ist das attraktiv, weil die Reaktion gegen\u00fcber den meisten bereits in einem Peptid vorhandenen funktionellen Gruppen wie Aminen, Carbons\u00e4uren und Thiolen unempfindlich ist. Dadurch l\u00e4sst sich eine Markierung, eine Sonde oder eine Oberfl\u00e4che koppeln, ohne den Rest der Peptidstruktur zu st\u00f6ren.<\/p>\n
Innerhalb der Azid-Alkin-Cycloaddition gibt es zwei Hauptvarianten. Die kupferkatalysierte Version (CuAAC, Cu(I)-catalyzed azide-alkyne cycloaddition) ist schnell und kosteng\u00fcnstig, doch Kupferr\u00fcckst\u00e4nde k\u00f6nnen Peptide durch oxidative Prozesse sch\u00e4digen und sind schwer vollst\u00e4ndig zu entfernen \u2014 ein Punkt, der bei der anschlie\u00dfenden analytischen Kontrolle zu beachten ist. Die kupferfreie Variante (SPAAC, strain-promoted azide-alkyne cycloaddition) verwendet statt eines Katalysators ein ringgespanntes Cyclooctin. Diese Reaktion verl\u00e4uft langsamer, vermeidet aber eine Metallkontamination vollst\u00e4ndig, was relevant ist, wenn die Forschungsprobe anschlie\u00dfend mit empfindlichen Detektionsverfahren wie der Massenspektrometrie analysiert wird. In der Praxis h\u00e4ngt die Wahl zwischen den beiden Varianten von der erforderlichen Reaktionsgeschwindigkeit, den verf\u00fcgbaren Reagenzien und der Toleranz der nachgelagerten Forschung gegen\u00fcber Metallspuren ab.<\/p>\n
Um Click-Chemie einzusetzen, muss zun\u00e4chst eine der beiden reaktiven Gruppen in das Forschungspeptid eingebaut werden. Dies geschieht meist auf einem von zwei Wegen. W\u00e4hrend der Fmoc-Festphasensynthese kann eine nicht nat\u00fcrliche Aminos\u00e4ure mit einer Azid- oder Alkin-Seitenkette an einer vorab gew\u00e4hlten Position der Sequenz eingebaut werden, was die volle Kontrolle \u00fcber die Position der reaktiven Gruppe erm\u00f6glicht. Alternativ kann eine vorhandene funktionelle Gruppe \u2014 meist ein freies Amin am N-Terminus oder eine Lysin-Seitenkette \u2014 nach der Synthese mit einem Reagenz chemisch umgesetzt werden, das eine Azid- oder Alkingruppe einf\u00fchrt. Beide Wege haben Folgen f\u00fcr die Reinheitsanalyse: Ein zus\u00e4tzlicher Syntheseschritt bedeutet in der Regel eine zus\u00e4tzliche Runde HPLC-Aufreinigung und eine kontrollierte Best\u00e4tigung der korrekten Masse, bevor die Kopplung durchgef\u00fchrt wird.<\/p>\n
Im Laborkontext wird Click-Chemie vor allem genutzt, um Forschungspeptide an nachweisbare oder funktionelle Einheiten zu koppeln, ohne die Peptidstruktur selbst zu beeintr\u00e4chtigen. Beispiele aus der Literatur sind die Kopplung eines Fluorophors f\u00fcr bildgebende Studien, die Anbindung eines Peptids an einen festen Tr\u00e4ger oder eine Sensoroberfl\u00e4che f\u00fcr Bindungsstudien sowie die Bildung von Peptid-Polymer-Konjugaten f\u00fcr die Materialforschung. Da der entstehende Triazolring chemisch sehr stabil ist, bleibt die Verkn\u00fcpfung unter einer Vielzahl analytischer und experimenteller Bedingungen intakt, was der Reproduzierbarkeit zugutekommt.<\/p>\n
Wie bei jeder Modifikation eines Forschungspeptids ist die Charakterisierung nach der Reaktion unerl\u00e4sslich. LC-MS best\u00e4tigt, ob die Massenverschiebung der erwarteten Triazolbildung entspricht und ob noch nicht umgesetztes Ausgangsmaterial vorhanden ist. Die analytische HPLC zeigt, ob die Konjugationsreaktion quantitativ verlaufen ist oder ob ein zus\u00e4tzlicher Aufreinigungsschritt n\u00f6tig ist, um das gekoppelte Produkt von nicht umgesetztem Peptid zu trennen. Bei CuAAC-Reaktionen wird h\u00e4ufig zus\u00e4tzlich auf verbleibende Kupferspuren gepr\u00fcft, zum Beispiel mit ICP-MS, um sicherzustellen, dass die endg\u00fcltige Probe f\u00fcr die vorgesehene Folgeforschung geeignet ist.<\/p>\n
In den vergangenen zwanzig Jahren hat sich die Click-Chemie zu einem Standardwerkzeug der Biokonjugationschemie von Peptiden entwickelt, gerade weil die Reaktion vorhersagbar, selektiv und gut charakterisierbar ist. F\u00fcr Labore, die Forschungspeptide mit Markierungen, Oberfl\u00e4chen oder anderen funktionellen Einheiten kombinieren, bietet die Wahl zwischen CuAAC und SPAAC ein direktes Mittel, Geschwindigkeit gegen die Reinheit des Endprodukts abzuw\u00e4gen.<\/p>\n
Dutch Peptide Labs liefert Forschungspeptide ausschlie\u00dflich f\u00fcr Labor- und Forschungszwecke. Unsere Produkte und die Informationen auf dieser Seite sind nicht f\u00fcr den menschlichen oder tierischen Verzehr, f\u00fcr diagnostische Zwecke oder f\u00fcr therapeutische Zwecke bestimmt.<\/em><\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Was macht eine Reaktion zur \u201eClick-Chemie\u201c? Click-Chemie ist ein Sammelbegriff f\u00fcr eine Klasse chemischer Reaktionen, die schnell, selektiv und unter milden Bedingungen ablaufen, mit hoher Ausbeute und wenigen unerw\u00fcnschten Nebenprodukten. Die bekannteste Variante in der Peptidforschung ist die Azid-Alkin-Cycloaddition: Eine Azidgruppe und eine Alkingruppe reagieren miteinander zu einem stabilen Triazolring. F\u00fcr Labore, die mit Forschungspeptiden […]<\/p>\n","protected":false},"author":0,"featured_media":0,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"categories":[232],"tags":[],"class_list":["post-546","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-uncategorized-de"],"acf":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/546","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=546"}],"version-history":[{"count":1,"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/546\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":81632,"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/546\/revisions\/81632"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=546"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=546"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/dutchpeptidelabs.nl\/de\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=546"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}